Ceditest CSFV 2.0 猪瘟病毒抗体检测试剂盒 完全排除其它瘟病毒的干扰 一、简介 猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是一种必须申报并在大部分养猪国家具有重要经济意 义的猪传染性病毒病。为了有利于防止病毒传播并控制该病,对感染猪进行快速检测是最根本 的。“金”标准试验是 Holm-Jensen阐述的中和过氧化物酶联试验(NPLA),然而 NPLA既费力 又耗时,难于标准化,不适合用于大量血清的检测。因此,快速简便的ELISA 方法已被成功研 制出来(见参考文献 2、3、4、5)。 然而,CSFV 与同属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和边界病病毒(BDV)非常相似。BVDV 或 BDV抗体的交叉反应会导致假阳性 ELISA 结果,在靠近 BVDV或 BD牛群的猪场情况尤其 如此。为了防止BVDV或 BDV抗体交叉反应引起的假阳性结果,一种特异性检测针对CSFV E2 蛋白 A区抗体的 ELISA 已被研制出来。众所周知,A区比 E2 蛋白 B、C 和 D区更具有 CSFV 特异性。 无论是 CSFV 强毒株、中等毒力毒株还是弱毒株,本试剂盒均能检测出其感染早期的抗 体。CSFV 弱毒株的抗体检测对追踪CSFV 亚临床感染是极其重要的。另外,CSFV E2 蛋白 A 区阻断抗体的特异性检测增加了本试剂盒的特异性。 试剂盒含有试验所需的所有成分,可检测180 份样品。
CSFV 2.0 具有以下几个特征: Ceditest 1. 高敏感性和特异性 2. 方便简单的操作步骤 3. 有利于时间控制(在 2 个小时内完成 3 步操作) 4. 适用于大规模筛选 二、参考文献 (1) Holm Jensen, M. Acta Vet. Scand. 22, 85-98, 1981. (2) Wensvoort, G., Bloemraad, M. and Terpstra, C. Vet. Microb. 17, 129-140, 1988. (3) Wensvoort, G. J. Gen. Virol. 70, 2865-2876, 1989. (4) Wensvoort, G., Boonstra, J. and Bodzinga, B.G. J. Gen. Virol. 71, 531-540, 1990. (5) Colijn, E., Bloemraad, M. and Wensvoort G. Vet. Microbiol. 59, 15-25, 1997. 三、应用 在 CSFV 根除计划中、猪瘟爆发后及监测国家或地区无猪瘟病毒状态的过程中,必须对大 CSFV 2.0 就是专为此目的而设计的。例如,在解除猪瘟病毒爆 量血清进行筛选检测,Ceditest 发后的移动限制措施之前,必须对大量血清进行检测以追踪其它可能感染的病猪群。此外, CSFV 弱毒株抗体的检测对追踪 CSFV 的亚临床感染也是极其重要的。 四、检测原理
Ceditest CSFV 2.0 中使用的关键试剂是一个针对CSFV 囊膜蛋白 E2(GP-55)A 区表位的单
克隆抗体。选择 A区是因为该区比 B、C、D区更特异。将单克隆抗体用辣根过氧化物酶(HRPO) 标记并作为酶标结合物用于测定待测样品中CSFV E2 蛋白抗体。酶标板用杆状病毒系统表达的 E2 蛋白包被。 将待测样品和样品稀释液加入酶标板各孔中并在 37℃孵育。洗板后,每孔加入酶标单抗并 在 37℃孵育。洗板后,将直接使用的底物/显色剂溶液加入各孔。室温孵育后,终止颜色反应并 测量。如果酶标单抗与CSFV 抗原的特异表位结合,就会出现颜色反应,表明待测样品中不存 在 CSFV 特异性抗体;相反,如果待测样品中的CSFV 特异性抗体阻断了特异表位,单克隆抗 体就不能与抗原表位结合,不出现显色反应,表明待测样品中存在CSFV 特异性抗体。 试剂盒中有 3 份可直接使用的参考血清,分别为阳性对照、弱阳性对照和阴性对照。阴性 值最大。弱阳性对照和阳性对照的阻断率应大于50%。 对照的 OD450
五、一般评述 本说明书的内容改变不用另行通知。本说明书在出版时是完整而正确的,赛迪诊断公司不 承担本说明书中出现的任何错误。赛迪诊断公司在任何情况下都不应该对操作不当引起的损失 负责,也不应该对经济损失、财产损失或其他由赛迪产品的使用、丢失引起的任何损失负责。 六、试剂盒的组成 - 2 块酶标板 - 1 瓶浓缩酶标结合物 - 1 瓶阴性对照(直接使用) - 1 瓶弱阳性对照(直接使用) - 1 瓶阳性对照(直接使用) - 1 瓶样品稀释液(直接使用) - 1 瓶酶标结合物稀释液(直接使用) - 1 瓶显色剂/底物溶液(直接使用) - 1 瓶终止液(直接使用) - 1 瓶浓缩洗液 - 1 块封口膜 七、贮存条件 如果不立即使用,可将试剂盒储存于 4℃直至过期。 八、注意事项 - 仔细阅读底物/显色剂溶液瓶上的标签内容。 - 终止液为强酸,避免接触皮肤和眼睛。 - 试剂盒中的试剂在使用之前要恢复至室温(20 ¨C 2℃)
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